Gelis aktyvistas nuo sąnarių

Medžiaga turi malonų kvapą ir nuoseklumą. Paulas Braggas, alternatyviosios medicinos aktyvistas, natūropatas ir sveikos gyvensenos propaguotojas, mano, kad judėdami, mankštindamiesi ir tiesdami stuburo koloną, mes sustipriname raumenis ir raiščius, kurie palaiko stuburo normalią būseną..

Interleukino-1β poveikis osteoklastų sąlygojamos terpės įtakai želatinazėms chondrocituose, veikiant mitogeno aktyvintoms proteinų kinazėmsRugpjūtis Anotacija Manoma, kad osteoartritas yra interaktyvus patologinis procesas, apimantis kremzlę, subchondralinį kaulą ir sinoviumą. Sinoviumo signalai vaidina svarbų vaidmenį kremzlės metabolizme, tačiau mažai žinoma apie šalinama skausmas rankų sąnarius poveikį kaulams.

Be to, kolagenazės ir stromelizinas-1 yra susiję su kremzlės katabolizmu per mitogeno aktyvuotą baltymų kinazę MAPKtačiau želatinazių vaidmuo nėra išaiškintas. Čia ištyrėme osteoklastinių signalų įtaką kondrocitams, apibūdinant interleukino-1β IL-1β sukeltų želatinazių ekspresiją per MAPK signalizaciją. Mes nustatėme, kad osteoklastų sąlygota terpė susilpnino želatinazės aktyvumą chondrocituose.

Tačiau IL-1β sukėlė padidėjusį želatinazės aktyvumo lygį kondicionuotoje terpės grupėje, palyginti su monokultūruota chondrocitų grupe. Konkrečiau, IL-1β atstatė aukštą želatinazės aktyvumo lygį c-Jun N-terminalo kinazės inhibitorių iš anksto apdorotuose kondrocituose kondicionuotoje terpėje ir lėmė mažesnius želatinazės aktyvumo lygius ekstraląsteliniuose signaluose reguliuojamuose kinazėse arba p38 inhibitorių paruoštuose kondrocituose.

Genų ekspresija paprastai koreliuoja su baltymų ekspresija.

Užduotys ir apribojimai

Apibendrinant, šie rezultatai pirmą kartą rodo, kad osteoklastų signalai gali paveikti želatinazės aktyvumą chondrocituose.

Be to, šie duomenys rodo, kad IL-1β atkuria želatinazės aktyvumą per MAPK inhibitorius; ši informacija gali padėti geriau suprasti želatinazės moduliavimą sąnarių kremzlėje. Įvadas Osteoartritas OAlėtinė ir degeneracinė sąnarių liga, yra labiausiai paplitęs tarp artritinių ligų.

Taip pat buvo įrodyta, kad sinoviumo makrofagai gali paveikti chondrocitus. Yra rankų bendra kremas, kad keli citokinai yra stiprūs kremzlės metabolizmo mediatoriai.

Stromelysins MMP-3, ir sugeba degraduoti kolagenus pvz.

Produktai cistito skausmui malšinti Kaip išgydys vaistai nuo cistito?

Želatinazės taip pat gali aktyvuoti kitus MMP, pavyzdžiui, kolagenazes. Šie trys MAPK kanalai yra tarp labiausiai ištirtų signalų perdavimo tinklų ir įrodyta, kad jie prisideda prie įvairios ląstelių funkcijos. Želatinazės, kurios iš esmės yra ekspresuojamos gilioje kremzlės zonoje, vaidina lemiamą vaidmenį ECM homeostatinėje pusiausvyroje vyrių regione tarp kremzlės ir kaulo.

Spontaniniai OA modeliai ir pacientai rodo, kad padidėjęs kaulų rezorbcija atsiranda ankstyvoje OA vystymosi stadijoje, o kaulų rezorbcijos faktorių blokavimas apsaugo nuo kremzlės pažeidimo. Norėdami išbandyti mūsų hipotezes, surinkome kondicionuojamą terpę iš osteoklastų, kad ištirtume, kaip želatinazių aktyvumas chondrocituose buvo veikiamas osteoklastų išskiriamų faktorių. Tada IL-1β buvo pridėta prie terpės indukuotos želatinazės ekspresijai.

Galiausiai, ištyrėme želatinazių ir metaloproteinazių audinių inhibitorių TIMPs geno ekspresiją chondrocituose, apdorotuose su MAPK inhibitoriais arba be jų. Metodai ir medžiagos Chondrocitų kultūra Šiam tyrimui naudojamos gyvūninės medžiagos buvo gautos pagal etikos principus, o protokolą peržiūrėjo ir patvirtino mūsų institucinė peržiūros taryba.

Chondrocitai buvo izoliuoti iš 1 dienų amžiaus pelės kelio sąnario.

Trumpai tariant, pelė buvo nužudyta ir sterilizuota, o kelio sąnarys buvo surenkamas oftalmologinėmis žirklėmis. Nulupta kelio sąnario epidermė. Surinkta kelio sąnario dalis buvo supjaustyta mažais gabalais ir 30 min. Po to trys trys trys viršutiniai tirpalai pašalinami ir 3 val. Osteoklastų kondicionuojamų terpių rinkimas Daugiasluoksnės osteoklastai pelės šaltinis buvo paskatinti, kaip aprašyta anksčiau. Indukcinė terpė, kurioje yra kondicionuojama terpė, buvo keičiama kas antrą dieną.

Daugiasluoksnės osteoklastai, turintys daugiau nei du branduolius, buvo matomi po 2 dienų indukcijos. Indukcija palaikoma ir subalansuota kitais 24 val. Po 12, 24, 48 ir 72 val.

Skausmas su šildančiu nugaros kompresu

Po inkubacijos zimografijai surinkti μl terpės mėginių. Pusiau kiekybiškai polimerazės grandinės reakcijai PCR 2 val. Buvo surinkti ląstelių lizato mėginiai 1 µl. Chondrocitams buvo leista subalansuoti 24 valandas. Tada chondrocitai buvo suskirstyti į dvi grupes.

Pavedimai ir apribojimai

Medžiagos mėginiai μl buvo surinkti 12, 24, 48 ir 72 val. Geno lygmenyje po 2 val. Gydymas inhibitoriais Prieš apdorojimą kondrocitai prieš badą buvo tokie patys, kaip aprašyta aukščiau. Pusiau kiekybiniam PCR. Norint ištirti IL-1β vaidmenį gelis aktyvistas nuo sąnarių iš anksto apdorotuose chondrocituose, po 30 min inkubavimo su inhibitoriumi į IL-1β buvo pridėta į monokultūrą ir bendrai auginamus kondrocitus. Resazurino tirpalai 10 μl buvo įpilti į μL ląstelių suspensiją mėginio aptikimui, o 10 μl resazurino, pridėto į μl šviežios kultūros terpės, buvo kontrolinė medžiaga.

Mėginiai apėmė ir kontrolinę grupę, ir IL-1β- ir inhibitorių grupes; visos gydytos grupės buvo normalizuotos į kontrolinę grupę.

Izoliuota RNR buvo ištirpinta vandenyje be RNazės ir kiekybiškai išmatuota pagal spektrofotometrą sugeriant absorbciją esant nm. Pasirinkti pradmenų rinkiniai parodyti 1 lentelėje. Pagrindinės vietinės lygiavimo paieškos priemonės BLAST buvo naudojamos visų pradmenų sekų paieškai, siekiant užtikrinti genų specifiškumą.

PCR programa sudarė 30 s denatūracijos ciklą 94 ° C temperatūroje, 30 s dengimo ciklą 55—65 ir 72 ° C temperatūroje, 30 s pailgėjimo ciklą, 25—28 amplifikacijos ciklus. Reakcija buvo pradėta aktyvuojant polimerazę su 5 min. Pradiniu inkubavimu 95 ° C temperatūroje. Stiprinimas buvo pasiektas su 45 ciklų, kurių denatūracija buvo 15 s, esant 94 ° C temperatūrai, 15 s sušildymas 64 ° C temperatūroje ir 15 s pailgėjimas 72 ° C temperatūroje.

Programa baigta lydymosi kreivės analize. Visi eksperimentai buvo atlikti trimis egzemplioriais. Kiekvieno geno kopijų numeriai buvo nustatyti pagal ciklo slenkstį t Ct. Norint atgauti fermentų aktyvumą, pašalinant SDS, geliai po elektroforezės buvo tris kartus plaunami 1, gerklės sąnarių su šepečiai kai lankstant val.

Raukšlių gydymas akimis

Kiekybiniai matavimai buvo griežtai laikomi gamintojo pateiktais protokolais. Kiekvienam mėginiui atlikti keturiolikiniai tyrimai ir buvo užfiksuota absorbcija esant nm.

Be to, prieš imant mėginį, mėginio paruošimo metu auginimo terpės buvo praskiestos 10 kartų. Statistinė analizė Statistinė analizė atlikta taikant vienpusį dispersijos analizę, siekiant nustatyti, ar tarp grupių egzistavo skirtumai. Post-hoc analizė panaudojo Fisher'o saugomus mažiausiai reikšmingus skirtumus.

1. "Activist-gel": instrukcija, programa ir atsiliepimai
2. Priežastis keista.

Ląstelių gyvybingumas neturėjo skirtumų tarp kontrolinės grupės ir gydytų grupių. Koncentracijos intervalai buvo nurodyti ankstesniuose duomenyse. Išmatuotas ECM skilimo fermento želatinazių aktyvumas 1 pav. Atlikus kondicionuotą terpę, nustatyta, kad chondrocitų išskiriamas MMP-2 sumažėjo, palyginti su sekrecija iš monokultūrinių chondrocitų. Be to, aktyvi MMP-2 forma 65 kDa buvo tik labai mažai 1b pav.

Laiku sukauptas MMP-2 produkcijos kiekybinis nustatymas parodė, kad MMP-2 aktyvumas buvo mažesnis bendrojo kultivavimo grupėje nei mono-kultūros grupė 1c pav. Po ko-kultūros, MMP-9 gelis aktyvistas nuo sąnarių osteoklastų buvo aptikta terpėje 12 ir 24 val. Apačioje dešinėje pusėje 1b paveiksletačiau ekspresija sumažėjo po 48 val. Osteoklastų sąlygota terpė susilpnina chondrocitų išskiriamų želatinazių aktyvumą.

Vertės buvo lyginamos su 12 val. Kiekybiniai duomenys apie bendrą aktyvumą reiškia 72 h laiko taškus monokultūruotuose ir kartu kultivuotuose chondrocituose.

Pilno dydžio vaizdas IL-1β sukelia nuo dozės priklausomą želatinazių padidėjimą, kurį išskiria vienkultūrinės ir bendros kultūros chondrocitai Po to želatinazių aktyvumas buvo ištirtas po indukcijos eksogeniniu IL-1β, kuris paprastai yra in vivo mikroorganizmų uždegimo OA kremzlės sluoksnyje.

Monokultūrinėje grupėje IL-1β sustiprino MMP-2 ir -9 ekspresijas priklausomai nuo laiko ir dozės 2a pav. IL-1β padidina želatinazių aktyvumą priklausomai nuo dozės tiek monokultūruotuose, tiek kartu kultivuotuose chondrocituose.

Pilno dydžio vaizdas IL-1β atkuria želatinazių aktyvumą MAPK inhibitorių iš anksto apdorotuose chondrocituose, ypač osteoklastų kondicionuotoje terpės grupėje Nustatyta, kad išoriniai antagonistai yra veiksmingi MMP pvz.

• Liaudies gydymo metodai iš periatritis peties sąnario
• Posted on

Čia mes nustatėme, kad gydymas IL-1β paskatino MMP-2 ir -9 aktyvumą specifiniuose MAPK inhibitoriais apdorotuose kondrocituose tiek monokultūriniuose, tiek kartu kultivuotuose chondrocituose. Inhibitorių apdoroti chondrocitai sumažino želatinazės koncentraciją visuose MAPK keliuose, tačiau IL-1β pridedant inhibitorių apdorotiems kondrocitams atstatė želatinazės aktyvumą 3a pav. Bendrojoje kultivavimo grupėje želatinazės atstatymas ERK ir p38 buvo mažesnis bendro kultūrų grupėje, lyginant su monokultūrine grupe, išskyrus aktyvias MMP-9 formas ERK ir p38 iki 4, 87 karto ir 1, 48 kartoatitinkamai, palyginti su mono kultūros grupėje.

Tada apskaičiavome bendrą želatinazių aktyvumą tarp skirtingų IL-1β gydytų grupių.

Kelokot raukšlių gelis

Mes nustatėme, kad IL-1β atstatytas želatinazės aktyvumas ERK ir p38 paprastai buvo mažesnis, lyginant su JNK, bet vis dar didesnis nei normaliose chondrocituose tiek vienkultūrinėse, tiek bendrai auginamose grupėse. IL-1β atkuria didelius želatinazių aktyvumus MAPK specifiniuose inhibitoriuose apdorotuose monokultūruotuose ir kartu kultivuotuose chondrocituose.

Nurodyti kiekybiniai duomenys nurodo 72 h laiko taškus. Skalės juostos, standartinis nuokrypis. Mes nustatėme, kad Bay žymiai sumažino želatinazės ekspresiją. Be to, IL-1β negalėjo atstatyti želatinazės ekspresijos Bay iš anksto apdorotose monokultūrinėse ir bendro kultūros chondrocituose, ir sumažintos želatinazės buvo panašaus lygio kaip ir normaliuose kondrocituose. GAPDH ir β-aktinas buvo naudojami kaip etaloniniai genai.

Tomas Augulis - Kalėdų naktį tylią

Produkto dydžiai nurodyti kairėje juostoje. GAPDH ir β-aktinas buvo naudojami kaip vidaus kontrolė. Tada mes naudojome qPCR, kad patvirtintume JNK kelio inhibitoriaus buvimo pakitimus, kuriuose želatinazės aktyvumas daugiausiai atkurtas.

Рубрика: Plaštakų sąnarių ir raiščių ligos

Rezultatai parodė, kad jie atitinka pusiau kiekybinio PGR. Mes taip pat parodėme, kad IL-1β sustiprino tiek MMP-1, tiek ir -3 monokultūruotus ir bendrai kultivuotus chondrocitus papildomas S2 pav. Diskusija Apibūdinant želatinazių IL-1β atstatytą aktyvumą tarp inhibitorių iš anksto apdorotų monokultūrinių ir bendrai kultivuotų chondrocitų, pateikiame naujų įžvalgų apie osteoklastų signalų įtaką kondrocitams, nurodant kondicionuojamą terpę, gautą iš osteoklastų, paveiktų chondrocituose.

Šiame tyrime nustatyta, kad: 1 išskirti veiksniai iš osteoklastų susilpnino želatinazių gelis aktyvistas nuo sąnarių 2 IL-1β sukeltas želatinazių aktyvumas bendrai kultivuojamuose kondrocituose buvo gerokai didesnis nei monokultūriniuose chondrocituose; 3 IL-1β atstatė želatinazės aktyvumą MAPK inhibitorių paruoštuose kondrocituose; gelis aktyvistas nuo sąnarių trans-transkripcijos lygmeniu IL-1β atkurė aukštus želatinazės kiekius bendrai kultivuotuose kondrocituose.

OA gali būti apibrėžiamas kaip kompleksinis arba interaktyvus skilimo ir remonto procesas, apimantis kremzlę, subchondralinį kaulą ir sinovialinę membraną. Ankstesni tyrimai parodė kolagenazių, citokinų ir augimo faktorių ekspresijos lygius eksperimentiniuose gyvūnų modeliuose, kurie imituoja žmonių liga.

Mėlynės hipertenzijai: aukšto kraujo spaudimo receptai Auksinių ūsų hipertenzijai receptas

Naujausiuose tyrimuose mokslininkai ištyrė sąnarių kremzlės ir sinovialinės membranos persikėlimą. D'Andrea P et al. Mūsų tyrime nustatėme chrosrocitų ir osteoklastų kryžminio ryšio mechanizmą; šis kryžminio moduliavimo želatinazės aktyvumas.

Remiantis klinikiniais įrodymais, kremzlės pažeidimai dažnai lydi kaulų pažeidimus.